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【課程大綱】

什么是微生物檢驗(yàn)員？

微生物檢驗(yàn)員怎么獲取？企業(yè)怎么獲取微生物檢驗(yàn)員證書？

采樣的要求 ：1、嚴(yán)格遵守樣品采集的操作規(guī)程。
2、所采樣品必須具有代表性。
3、采樣操作要防止污染，防止變質(zhì)、損壞、丟失。
4、不得加入防腐劑、固定劑等。  
5、樣品采集和現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定必須有二人以上參加 。

食品微生物檢驗(yàn)的采樣方法
國(guó)際食品微生物規(guī)格委員會(huì)（ICMSF）取樣方案；
美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）的取樣方案；
世界糧農(nóng)組織（FAO）取樣方案；
我國(guó)的食品取樣方案。
原則： 能采取完整包裝的樣品就不拆開取樣，必須拆開包裝取樣的應(yīng)按無菌操作進(jìn)行取樣.
)液體樣品采樣方法
生產(chǎn)工序監(jiān)測(cè)采樣：車間空氣采樣：將5個(gè)直徑90mm的普通瓊脂平板分別置于車間的四角和中部，打開平皿蓋5min，然后蓋蓋送檢。

食物中毒微生物檢驗(yàn)的取樣
可疑中毒源食品餐具
病人的嘔吐物
糞便或血液
糞便或血液
人畜共患病原微生物檢驗(yàn)的取樣

當(dāng)懷疑某一動(dòng)物產(chǎn)品可能帶來人畜共患病病原體時(shí)，應(yīng)結(jié)合畜禽傳染病學(xué)的基礎(chǔ)知識(shí)，采取病原體最集中、最易檢出的組織或體液送檢驗(yàn)室檢驗(yàn)。


一、微生物檢驗(yàn)員證書頒發(fā)：

CCAA。

二、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)費(fèi)用：

1480元，費(fèi)用包含：培訓(xùn)費(fèi)、資料費(fèi)、證書費(fèi)、快遞費(fèi)、發(fā)票。

1．取經(jīng)37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、銅綠假單胞菌 10104肉湯培養(yǎng)物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸鹽培養(yǎng)物1ml+9ml鹽水10倍稀釋至10-5 ~10-7為50~100個(gè)/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用 2．取經(jīng)25℃ 培養(yǎng)18~24小時(shí)的白色念珠菌霉菌液體培養(yǎng)物1ml+9 ml鹽水10倍稀釋至10-5 ~10-6為50~100個(gè)/ml，做活菌計(jì)數(shù)備用 3．取經(jīng)25℃ 培養(yǎng)1周的黑曲霉菌斜面培養(yǎng)物，加3~5ml鹽水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用標(biāo)準(zhǔn)比濁管比濁，與濁度相當(dāng)后，取1 ml +9 ml鹽水=10-1，逐管10倍稀釋為10-4約50~100個(gè)/ ml，做活菌計(jì)數(shù)備用

結(jié)果判斷：供試品組的菌回收率、稀釋劑對(duì)照組的菌回收率。 試驗(yàn)組的菌回收率=[（試驗(yàn)組平均菌落數(shù)–供試品對(duì)照組平均菌落數(shù)）/菌液組平均菌落數(shù) ]×100% 稀釋劑對(duì)照組的菌回收率=[（稀釋劑對(duì)照組的平均菌落數(shù)/菌液組的平均菌落數(shù)）]×100% ●判斷標(biāo)準(zhǔn): 菌回收率均不低70% 。

試驗(yàn)菌株：按規(guī)定檢查的控制菌選擇相應(yīng)驗(yàn)證的菌株。 ●陰性對(duì)照菌株:設(shè)立陰性對(duì)照菌是為了驗(yàn)證該控制菌檢查方法的專屬性。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、梭菌用大腸埃希菌；大腸埃希菌、沙門菌、大腸菌群用金黃色葡萄球菌。 ●菌種的要求：不得超過5代。采用適宜的方法保存。 ●菌液制備:10～100cfu/ml。

三、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)內(nèi)容

1.檢驗(yàn)的化學(xué)基礎(chǔ);

2.實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí);

3.實(shí)驗(yàn)室常用儀器講解;

4.檢驗(yàn)技術(shù)及微生物檢驗(yàn)技術(shù)，大腸桿菌，菌落總數(shù)，無菌、藥典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志賀氏菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌等菌種的實(shí)操視頻。

四、微生物檢驗(yàn)員證書培訓(xùn)相關(guān)

建立一個(gè)無菌取樣的分析清單 ，按清單準(zhǔn)備工具、容器、設(shè)施（衣服、發(fā)網(wǎng)等）； 盛樣品的容器應(yīng)當(dāng)被預(yù)先標(biāo)識(shí)，如樣品號(hào)、取樣日期、取樣人等； 檢查所有取樣設(shè)施、工具和容器的滅菌日期、滅菌時(shí)間，并做好標(biāo)識(shí)； 準(zhǔn)備好所用的各種試劑，做好普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂或其他選擇必培養(yǎng)基； 注意干冰或濕冰的準(zhǔn)備及保存。

大樣：整批檢驗(yàn) 中樣：采樣員從大樣各部分取得的混合樣（250克） 小樣：檢驗(yàn)員用來檢驗(yàn)的樣品（一般為25克）。 表面污染：50cm2 （5cm 2×10處） 罐頭食品：罐/批、班次 一般每個(gè)品種>3罐，可以以每配料罐或滅菌鍋為一批。

五、微生物檢驗(yàn)員證書相關(guān)

1、瓶裝液體樣品的處理 :用點(diǎn)燃的酒精棉球灼燒瓶口滅菌，接著用石炭酸或來蘇爾消毒后的紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開； 含有二氧化碳的樣品可倒入500mL磨口瓶?jī)?nèi)，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩，待氣體全部逸出后，取樣25mL檢驗(yàn)。

2、盒裝或軟塑料包裝樣品的處理 :將其開口處用75%酒精棉擦拭消毒，用滅菌剪子剪開包裝，覆蓋上滅菌紗布或浸有消毒液的紗布在剪開部分，直接吸取樣品25mL ，或傾入另一滅菌容器中再取樣25mL檢驗(yàn)。

固體樣品的處理：1、搗碎均質(zhì)法 ;將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g放入帶225mL稀釋液的無菌均質(zhì)杯中，8000~10000r/min均質(zhì)1~2min即可。

剪碎振搖法:將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣進(jìn)一步剪碎，放入帶225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :將中樣(≥100g)剪碎或攪拌混勻，從中取25g檢樣放入無菌乳缽中充分研磨后，再放入帶有225mL無菌稀釋液的稀釋瓶中，蓋緊蓋后充分搖勻。

整粒振搖法 :直接稱取25g整粒樣品置于帶有225mL稀釋液和直徑5mm左右玻璃珠的稀釋瓶中，蓋緊瓶蓋，用力快速振搖50次，振幅要大于40cm。

使用注意事項(xiàng) 不同的分析方法對(duì)試劑有不同的要求，因不同等級(jí)的試劑價(jià)格往往相差很遠(yuǎn)，純度越高價(jià)格越貴。不同等級(jí)試劑選擇不當(dāng)，會(huì)造成資金浪費(fèi)或影響化驗(yàn)結(jié)果。 化驗(yàn)員應(yīng)熟知試劑的性質(zhì)（如市售酸堿的濃度，試劑在水中的溶解度，有機(jī)溶劑的沸點(diǎn)、燃點(diǎn)，試劑的腐蝕性、毒性、爆炸性等）。 保護(hù)包裝瓶上的標(biāo)識(shí)，分裝或配制試劑后應(yīng)立即粘標(biāo)簽。決不可在瓶中裝與標(biāo)簽不符的物質(zhì)。無標(biāo)簽的試劑可取小樣檢定，不能用的要慎重處理，不應(yīng)亂倒。 一般溶液的標(biāo)識(shí)：溶液名稱、溶液濃度、配置人、配置日期。 標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)識(shí)：標(biāo)準(zhǔn)溶液名稱、濃度、標(biāo)定人、標(biāo)定日期、有效期。 取樣：固體用潔凈藥勺從試劑瓶中取出，決不可用手抓取；液體可用潔凈量筒倒取，不要用吸管伸入原瓶試劑吸取；取出的試劑不可倒回原瓶。 打開易揮發(fā)試劑時(shí)，不可把瓶口對(duì)準(zhǔn)自己臉部或別人�；瘜W(xué)試劑不可舌頭品嘗，一般不能作為藥用或食用。 不可用鼻子對(duì)準(zhǔn)試劑瓶猛吸氣，用手在試劑瓶上方扇動(dòng)，聞氣味。

標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液制備的一般規(guī)定見GB603-2002。 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：精確知道濃度的溶液。 滴定：將標(biāo)準(zhǔn) 加入到待測(cè)元素的溶液中的操作。 標(biāo)定：測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液準(zhǔn)確濃度的操作。 配制過程中所需的水必須是蒸鎦水或純凈水。 藥品標(biāo)識(shí)

國(guó)際食品微生物專業(yè)委員會(huì):國(guó)際食品微生物專業(yè)委員會(huì)

采樣基本原則 （1）各種微生物本身對(duì)人的危害程度各有不同。 （2）食品經(jīng)不同條件處理后，其危害度變化情況：①降低危害度；②危害度未變；③增加危害度。 根據(jù)（1）（2）的情況來設(shè)定抽樣方案并規(guī)定其不同采樣數(shù)。

n：系指一批產(chǎn)品采樣個(gè)數(shù)。  c：系指該批產(chǎn)品的檢樣菌數(shù)中，超過限量的檢樣數(shù)，即結(jié)果超過合格菌數(shù)限量的最大允許數(shù)。  m：系指合格菌數(shù)限量，將可接受與不可接受的數(shù)量區(qū)別開。  M：系指附加條件，判定為合格的菌數(shù)限量，表示邊緣的可接受數(shù)與邊緣的不可接受數(shù)之間的界限。

二級(jí)法只設(shè)有n、с及m值 以其一點(diǎn)作為食品微生物的限量值，只設(shè)合格判定標(biāo)準(zhǔn)m值，超過m值的，則為不合格品。 以生食海產(chǎn)品魚為例 n=5，c=0，m=102， （n=5即抽樣5個(gè)，c=0即意味著在該批檢樣中，未見到有超過m值的檢樣，此批貨物為合格品)。 在中等或嚴(yán)重危害的情況下使用二級(jí)抽樣方案

微生物檢驗(yàn)員證書



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【講師介紹】

微生物檢驗(yàn)員
食品化學(xué)微生物實(shí)驗(yàn)室
醫(yī)療器械行業(yè)申請(qǐng)GMP
化妝品行業(yè)

【培訓(xùn)對(duì)象】

1.企業(yè)主管食品質(zhì)量、安全標(biāo)準(zhǔn)及監(jiān)督管理工作崗位的人員、食品生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)銷單位、質(zhì)量監(jiān)督部門、衛(wèi)生檢驗(yàn)部門及有關(guān)科研、管理部門的管理人員、技術(shù)人員和檢驗(yàn)人員。

更新時(shí)間：2024/10/26 8:42:58